55
APRIL 24
TH
– 26
TH
, 2014 | OLOMOUC | THE CZECH REPUBLIC
ABS TRAC T BOOK
jak v centru, tak zejména na periferii a jejich denzita se blížila
hodnotám stadia pT1.
Závěr:
V naší studii jsme potvrdili, že vzrůstající denzita
FOXP3+Treg ve stromálním mikroprostřední maligních me-
lanomů v souvilosti s vertikálním růstem potvrzuje jejich vý-
znamnou roli ve vývoji tohoto onemocnění. Předpokládáme, že
kromě zvyšování denzity je důležitá i jejich redistibuce v oblasti
nádoru a jeho okolí.
13) PPAR
γ
ligand sensitizes prostate cancer cells
to the oxaliplatin treatment
Zapletal O.
1,2
, Straková N.
1,3
, Hofmanová J.
1,2
,
Vondráček J.
1,2
, Bouchal J.
3
, Ehrmann J.
3
, Kolář Z.
3
,
Kozubík A.
1,2
1
Department of Cytokinetics, Institute of Biophysics,
Academy of Sciences of the Czech Republic, v.v.i., Brno
2
Department of Animal Physiology and Immunology,
Institute of Experimental Biology, Faculty of Sciences,
Masaryk University, Brno
3
Department of Clinical and Molecular Pathology, Faculty
of Medicine and Dentistry, Palacky University Olomouc
Peroxisome proliferator activated receptors (PPARs) are
members of the large group of nuclear receptors. These
transcriptional factors can regulate metabolic processes,
inflammation, proliferation and differentiation of the cells.
Thiazolidinediones are synthetic ligands of PPARγ, which were
used for the treatment of diabetes mellitus type 2. One of the
most mutated gene in the tumors is tumour suppressor p53.
In addition, amplification of MDM genes or changed protein
expression are also often observed in many tumours. Protein
MDM2 represents a member of the family of E3 ligases. It is
well known that MDM2 is able to inhibit p53 transcriptional
activity. MDMX is a homolog of MDM2 and it supports MDM2
negative regulation of p53. Platinum-based drugs are broadly
used for the cancer treatment, but they are often inefficient
and have serious side effects. That is why new platinum-ba-
sed drugs are developed and their combinations with other
compounds are studied.
In our experiments PPARγ ligand – rosiglitazone (RGZ) and
platinum derivate – oxaliplatin (L-OHP) were used. Analyses
were performed on prostate cancer cell line BPH-1 CAFTD 03
and on samples from prostate cancer patients. We suggest
that combination of the drugs may be more effective than the
drugs used alone. Thus, the aim of our study was to analyze the
effects of combined application of RGZ and L-OHP in prostate
cancer cell lines and to detect changes of selected protein
expression in samples of prostate cancer patients.
Our results indicated that pretreatment of cancer cells
with RGZ sensitizes BPH-1 CAFTD 03 cell line to the effects of
L-OHP. We detected increased inhibition of proliferation and
block in G2/M phase of the cell cycle together with changes
in cyclin expressions after this type of treatment. Cell death
was detected by Annexin V assay and Western blot analysis.
After combination of RGZ and L-OHP we observed increased
percentage of the dead cells by Annexin V staining, but dec-
reased activity of caspases. It could indicate another form of
cell death in addition to apoptosis. Combined drug treatment
decreased PPARγ and MDMX protein expression which imply
important correlation of these two proteins in
in vitro
conditi-
ons. Moreover, this correlation was also confirmed in prostate
patient samples. Thus, our data suggest a possible link between
PPARγ and MDMX. Expression of MDM2 protein showed an
opposite pattern than expression of its partner MDMX and
p53 expression was not changed. Tumour suppressor p53 is
stabilized but nonfunctional in BPH-1 CAFTD 03 cell line. The
role of PPARγ in RGZ and L-OHP combined effects was verified
also by silencing of PPARγ using siRNA.
This work was supported by grant of Czech Science
Foundation No. 13-09766S, grant Internal Grant Agency of
Ministry of Health of the Czech Republic No. NT11201-5/2010,
grant CZ.1.07/2.4.00/31.0155 and project MUNI/A/0927/2013.
14) Jednonukleotidové polymorfizmy vybraných
genů u astrogliálních tumorů
Bielniková H.
1
, Mazura I.
4
, Dvořáčková J.
1,2,3
,
Delongová P.
1
, Tomanová R.
1
, Buzrla P.
1
, Šímová, J.
3
1
Ústav patologie FN Ostrava
2
LF OU Ostrava
3
CGB laboratoř Ostrava a.s.
4
1. LF Univerzita Karlova Praha
Úvod:
Astrogliální tumory jsou jedny z nejčastěji diagnos-
tikovaných tumorů nervového systému s velmi špatnou prog
nózou. Tato skupina nádorů je v mnoha aspektech různorodá.
Nádory se od sebe liší nejen morfologicky, ale také růstovým
potenciálem, rozsahem invazivního růstu, svou lokalizací v CNS
i klinickým průběhem v důsledku jejich progresivních vlast-
ností. Značná heterogenita je také v přítomnosti zjištěných
genetických alterací.
Díky molekulárně-biologickým metodám byla u astrogli-
álních tumorů identifikována řada genetických alterací, které
souvisejí se vznikem a rozvojem těchto nádorů. Propuknutí
nádoru většinou předchází nějaké iniciační poškození genu
a následně dále kumulující defekty, které vedou k progresi
nádoru.
Materiál a metody:
Bylo vyšetřeno 21 nativních mozko-
vých tkání pacientů s diagnózou glioblastoma multiforme,
anaplastického astrocytomu a pilocytárního astrocytomu.
Genomová DNA byla extrahována pomocí DNA kitu Qiamp
DNA kit (Qiagen). Kvalita DNA byla ověřena elektroforeticky
na agarozovém gelu a amplifikována podle optimalizovaného
protokolu pomocí cykléru T100™ Thermal Cycler (Bio-Rad).
Vytipované sekvence genů p53, EGFR, MDM2, PTEN a ERBB2
byly sekvenovány sekvenátoremABI Prism® 3100-Avant Genetic
Analyzer (Applied Biosystems).
Výsledky:
Ve třech z pěti vyšetřovaných genů bylo naleze-
no 20 typů jednonukleotidových polymorfizmů.
